2025-04-14 02:09:58
且方便標(biāo)號(hào)對(duì)比。為解決上述技術(shù)問(wèn)題,根據(jù)本實(shí)用新型的一個(gè)方面,本實(shí)用新型提供了如下技術(shù)方案:一種可以分離的細(xì)胞培養(yǎng)板,其包括底座、一號(hào)培養(yǎng)板、二號(hào)培養(yǎng)板、培養(yǎng)皿槽和橫向標(biāo)尺,所述底座頂部固定安裝有一號(hào)培養(yǎng)板,所述一號(hào)培養(yǎng)板頂部設(shè)置有梯形卡槽,所述一號(hào)培養(yǎng)板頂部設(shè)置有二號(hào)培養(yǎng)板,所述二號(hào)培養(yǎng)板底部固定安裝有與梯形卡槽相配合的梯形卡塊。作為本實(shí)用新型所述的一種可以分離的細(xì)胞培養(yǎng)板的一種方案,其中:所述一號(hào)培養(yǎng)板和所述二號(hào)培養(yǎng)板表面設(shè)置有培養(yǎng)皿槽,所述培養(yǎng)皿槽內(nèi)腔側(cè)壁設(shè)置有限位槽,所述限位槽內(nèi)腔固定安裝有限位彈簧,所述限位彈簧頂部貫穿限位槽設(shè)置有固定桿。作為本實(shí)用新型所述的一種可以分離的細(xì)胞培養(yǎng)板的一種方案,其中:所述一號(hào)培養(yǎng)板和二號(hào)培養(yǎng)板的前表面左側(cè)設(shè)置有縱向標(biāo)尺,所述一號(hào)培養(yǎng)板和二號(hào)培養(yǎng)板的前表面左側(cè)設(shè)置有橫向標(biāo)尺,所述一號(hào)培養(yǎng)板和所述二號(hào)培養(yǎng)板的頂部設(shè)置有防護(hù)蓋。作為本實(shí)用新型所述的一種可以分離的細(xì)胞培養(yǎng)板的一種方案,其中:所述梯形卡槽的前表面固定安裝有固定螺絲,所述梯形卡塊上設(shè)置有相配合的螺孔,所述梯形卡槽內(nèi)腔底部設(shè)置有滑槽,梯形卡塊底部設(shè)置有與滑槽相配合的滑塊。根據(jù)您的需要可以提供經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的多克隆細(xì)胞系或者單克隆細(xì)胞系。上海兔原代細(xì)胞購(gòu)買(mǎi)
本發(fā)明采用活塞式推進(jìn)桿外加正壓式肝素帽設(shè)計(jì),增強(qiáng)了瓶身的一體性,減少了污染的可能性,且通過(guò)注射器注水的方式可以自行控制纖維板和培養(yǎng)瓶底部的接觸程度,使得操作流程更可控。附圖說(shuō)明圖1是本發(fā)明的整體結(jié)構(gòu)示意圖。圖2是本發(fā)明的縱向剖面結(jié)構(gòu)示意圖。圖中標(biāo)記為:1-外接圓柱;2-正壓口;3-阻隔環(huán);4-彈簧;5-連接桿;6-加樣口;7-爬片瓶頸;8-纖維板;9-瓶底;10-直角三角支架;11-活動(dòng)圓盤(pán);12-纖維圓盤(pán);13-瓶身。具體實(shí)施方式下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。如圖1和2所示,一種一體式原代細(xì)胞爬片培養(yǎng)瓶,包括瓶身13,所述瓶身13的其中一側(cè)端部設(shè)有爬片瓶頸7和加樣口6,瓶身13的上端部設(shè)有外接圓柱,所述外接圓柱1的頂端封閉、下端與瓶身13連通,并且外接圓柱1內(nèi)設(shè)有活動(dòng)圓盤(pán)11和纖維圓盤(pán)12,所述活動(dòng)圓盤(pán)11位于纖維圓盤(pán)12的上方,活動(dòng)圓盤(pán)11的四周外壁與外接圓柱1的內(nèi)壁可滑動(dòng)接觸,并且在外接圓柱1內(nèi)壁上設(shè)有用于限制活動(dòng)圓盤(pán)11向上活動(dòng)的阻隔環(huán)3,同時(shí)在外接圓柱1位于活動(dòng)圓盤(pán)11上方的柱體上設(shè)有正壓口2,所述纖維圓盤(pán)12固定設(shè)置,并且在纖維圓盤(pán)12內(nèi)可活動(dòng)穿插有連接桿5,所述連接桿5上端與活動(dòng)圓盤(pán)11固定連接。上海組織原代細(xì)胞培養(yǎng)當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá)到90%以上時(shí),給細(xì)胞傳代。
4、凍存的細(xì)胞該如何開(kāi)始培養(yǎng)?(1)將一管細(xì)胞從液氮罐中取出,注意保護(hù)手和眼睛。(2)將凍存管快速的放入37℃水浴中,輕輕握住并旋轉(zhuǎn),直到管內(nèi)物體完全融化。(3)將凍存管立即從水浴中拿出,擦干,轉(zhuǎn)入無(wú)菌環(huán)境。(4)用70%的酒精沖洗凍存管,然后擦去多余酒精。(5)打開(kāi)蓋子,注意手指不要碰到里面的螺紋(注意,由于凍存管有負(fù)壓,開(kāi)蓋時(shí)可能會(huì)有少量溢出,這是正常現(xiàn)象)。(6)用多聚賴氨酸(或參照說(shuō)明書(shū))包被培養(yǎng)瓶。多數(shù)細(xì)胞推薦的接種密度為每平方厘米5000個(gè)細(xì)胞。(7)蓋好培養(yǎng)瓶的蓋子,輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細(xì)胞分布均勻。若需要?dú)怏w交換可打開(kāi)蓋子。(8)將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中(37℃,5%CO2,95%空氣)(9)放入培養(yǎng)箱后第6-16小時(shí)更換一次培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細(xì)胞。5、細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,多久更換一次培養(yǎng)基?這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。一般而言2-3天更換一次培養(yǎng)基,許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。注意:凍存細(xì)胞復(fù)蘇后,在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡的細(xì)胞。6、我能擴(kuò)增培養(yǎng)和再次凍存原代正常人類(lèi)細(xì)胞嗎?這取決于細(xì)胞的類(lèi)型。一些細(xì)胞類(lèi)型像神經(jīng)細(xì)胞,神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和一些生長(zhǎng)緩慢的上皮細(xì)胞。
在下面的描述中闡述了很多具體細(xì)節(jié)以便于充分理解本實(shí)用新型,但是本實(shí)用新型還可以采用其他不同于在此描述的其它方式來(lái)實(shí)施,本領(lǐng)域技術(shù)人員可以在不違背本實(shí)用新型內(nèi)涵的情況下做類(lèi)似推廣,因此本實(shí)用新型不受下面公開(kāi)的具體實(shí)施方式的限制。其次,本實(shí)用新型結(jié)合示意圖進(jìn)行詳細(xì)描述,在詳述本實(shí)用新型實(shí)施方式時(shí),為便于說(shuō)明,表示器件結(jié)構(gòu)的剖面圖會(huì)不依一般比例作局部放大,而且所述示意圖只是示例,其在此不應(yīng)限制本實(shí)用新型保護(hù)的范圍。此外,在實(shí)際制作中應(yīng)包含長(zhǎng)度、寬度及深度的三維空間尺寸。為使本實(shí)用新型的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚,下面將結(jié)合附圖對(duì)本實(shí)用新型的實(shí)施方式作進(jìn)一步地詳細(xì)描述。本實(shí)用新型提供如下技術(shù)方案:一種可以分離的細(xì)胞培養(yǎng)板,在使用的過(guò)程,拆卸簡(jiǎn)單且連接更加溫度,且方便標(biāo)號(hào)對(duì)比,請(qǐng)參閱圖1,包括底座100、一號(hào)培養(yǎng)板200、二號(hào)培養(yǎng)板300、培養(yǎng)皿槽400和縱向標(biāo)尺500;請(qǐng)?jiān)俅螀㈤唸D1,底座100底部固定安裝有支撐腳架110,具體的,支撐腳架110焊接在底座100的底部,底座100用于承載一號(hào)培養(yǎng)板200和二號(hào)培養(yǎng)板300,支撐腳架110用于支撐底座100;請(qǐng)?jiān)俅螀㈤唸D1,底座100頂部固定安裝有一號(hào)培養(yǎng)板200。血管疾病發(fā)生和發(fā)展的一個(gè)主要因素是由于血管平滑肌細(xì)胞轉(zhuǎn)變成為了具有繁殖能力的表型。
7)蓋好培養(yǎng)瓶的蓋子,輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細(xì)胞分布均勻。若需要?dú)怏w交換可打開(kāi)蓋子。(8)將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中(37℃,5%CO2,95%空氣)(9)放入培養(yǎng)箱后第6-16小時(shí)更換一次培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細(xì)胞。5、細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,多久更換一次培養(yǎng)基?這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。一般而言2-3天更換一次培養(yǎng)基,許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。注意:凍存細(xì)胞復(fù)蘇后,在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡的細(xì)胞。6、我能擴(kuò)增培養(yǎng)和再次凍存原代正常人類(lèi)細(xì)胞嗎?這取決于細(xì)胞的類(lèi)型。一些細(xì)胞類(lèi)型像神經(jīng)細(xì)胞,神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和一些生長(zhǎng)緩慢的上皮細(xì)胞,不推薦擴(kuò)增培養(yǎng)和再次凍存。其它的細(xì)胞類(lèi)型像成纖維細(xì)胞、星形細(xì)胞、腎系膜細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞等等,可以擴(kuò)增培養(yǎng)和再次凍存。然而,需要注意的是再次凍存的過(guò)程可能導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)性能的改變。7、培養(yǎng)瓶中應(yīng)該加入多少體積的培養(yǎng)基?我們推薦的用量為:T-25培養(yǎng)瓶5ml,T-75培養(yǎng)瓶15ml,T-150培養(yǎng)瓶30ml。人臍靜脈血管平滑肌細(xì)胞分離自臍帶組織,是臍靜脈的重要結(jié)構(gòu)之一。上海血液原代細(xì)胞培養(yǎng)
轉(zhuǎn)染的目的是產(chǎn)生重組蛋白,或特異性增強(qiáng)或控制轉(zhuǎn)染細(xì)胞中的基因表達(dá)。上海兔原代細(xì)胞購(gòu)買(mǎi)
下端伸入瓶身13并與設(shè)于瓶身13內(nèi)的纖維板8固定連接,并且在活動(dòng)圓盤(pán)11和纖維圓盤(pán)12之間的連接桿5上套裝有彈簧4。本實(shí)施例中,所述活動(dòng)圓盤(pán)11的四周設(shè)有密封圈,或活動(dòng)圓盤(pán)11可采用類(lèi)似注射器的密封橡膠塞,兼具密封和可活動(dòng)的性能本實(shí)施例中,所述彈簧4處于自然狀態(tài)或輕微壓縮狀態(tài)時(shí),活動(dòng)圓盤(pán)11與阻隔環(huán)3相接觸;在活動(dòng)圓盤(pán)11受壓時(shí),活動(dòng)圓盤(pán)11向下運(yùn)動(dòng),彈簧4壓縮,連接桿5向下并帶動(dòng)纖維板8一起向下,待壓力解除后,彈簧4伸張恢復(fù)并帶動(dòng)活動(dòng)圓盤(pán)11復(fù)位。本實(shí)施例中,所述纖維板8采用具有阻隔和透氣特性的柔性網(wǎng)格纖維材料制作;纖維板8整體被網(wǎng)格狀的纖維覆蓋,可根據(jù)需要定制不同目數(shù)的網(wǎng)格纖維。本實(shí)施例中,所述外接圓柱1的直徑為2cm,正壓口2的直徑為5mm,并可采用肝素帽封閉;活動(dòng)圓盤(pán)11和纖維圓盤(pán)12的直徑為。本實(shí)施例中,所述加樣口6為直徑,該開(kāi)口可通過(guò)螺紋連接透氣瓶蓋,爬片瓶頸7為類(lèi)棱柱狀,根據(jù)爬片組織大小可定制25cm2和75cm2底面積,所述瓶身13底部的四個(gè)角還設(shè)置有8個(gè)直角三角支架10。本一體式原代細(xì)胞爬片培養(yǎng)瓶的實(shí)驗(yàn)操作流程如下:一、器材準(zhǔn)備無(wú)菌鑷,無(wú)菌剪,胎牛血清,細(xì)胞培養(yǎng)基,胰蛋白酶,膠原酶(根據(jù)需求選用),70%醫(yī)用酒精,燒杯,無(wú)菌pbs。上海兔原代細(xì)胞購(gòu)買(mǎi)