2025-04-23 01:07:43
疾病神經(jīng)系統(tǒng)疾病模型動物抗抑郁對腦突觸體攝取5-HT、NA、DA的抑制作用(樣品篩選、IC50測定)大鼠強迫游泳試驗(大/小鼠,Noduls軟件、視屏分析)大/小鼠小鼠懸尾試驗(Noduls軟件、視屏分析)小鼠5-羥色胺增強試驗小鼠利血平誘導(dǎo)眼瞼下垂試驗小鼠育亨賓毒性增強試驗小鼠高劑量阿撲拮抗小鼠大鼠慢性輕度不可預(yù)見性刺激(CUMS)模型大鼠新環(huán)境進食抑制實驗大/小鼠小鼠腦內(nèi)單胺氧化酶MAO-A、MAO-B活性測定小鼠對新生大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞的保護作用(谷氨酸損傷、過氧化氫損傷、缺糖缺氧損傷、損傷等)新生大鼠對SH-SY5Y細(xì)胞合成分泌BDNF的作用SH-SY5Y細(xì)胞抗驚厥育亨賓毒性增強試驗小鼠戊四唑驚厥小鼠荷包牡丹堿驚厥小鼠印防己驚厥小鼠抗焦慮與戊巴比妥類藥物的協(xié)同作用小鼠對巴比妥閾下劑量的影響小鼠再入睡試驗小鼠曠場實驗(大/小鼠,全程攝像監(jiān)控、軟件處理)大/小鼠大鼠高架十字迷宮法(全程攝像監(jiān)控、軟件處理)大鼠大鼠穿梭箱法(全程攝像監(jiān)控、軟件處理)大鼠抗帕金森氏癥抗帕金森氏癥6-羥多巴胺致大鼠帕金森病模型大鼠MPTP模型(雙側(cè)損毀PD模型)大/小鼠氧化震顫素致顫模型大/小鼠疼痛。采用復(fù)合改良法造模,是目前 IgA 腎病中較為可靠、穩(wěn)定、成功率高,且病理、臨床指標(biāo)近人類 IgA 腎病的動物模型。上海C57動物模型服務(wù)
經(jīng)多級乙醇至水洗:二甲苯(i)5min→二甲苯(ⅱ)5min→100%乙醇2min→95%的乙醇1min→80%乙醇1min→75%乙醇1min→蒸餾水洗2min;4)蘇木素染色5分鐘,自來水沖洗;5)鹽酸乙醇分化30秒;6)自來水浸泡15分鐘;7)置伊紅液2分鐘。8)常規(guī)脫水,透明,封片:95%乙醇(i)1min→95%乙醇(ⅱ)1min→100%乙醇(i)1min→100%乙醇(ⅱ)1min→二甲苯石碳酸(3:1)1min→二甲苯(i)1min→二甲苯(ⅱ)1min→中性樹脂封固。9)顯微鏡下拍照。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在4個月時,與ctrl(對照)小鼠比較,sixko小鼠的視網(wǎng)膜外核層已經(jīng)開始變薄,表明感光細(xì)胞死亡(圖7)。實施例5視網(wǎng)膜冰凍切片免疫染色:取4月齡的由實施例2得到的gm20541基因敲除純合子小鼠斷頸處死后,快速取眼球,并放入4%的pfa中,冰上固定15min后,在角膜上剪口,然后繼續(xù)冰上固定。2h后,pbs緩沖液沖洗3遍,然后將眼球置于30%蔗糖溶液中脫水2h,然后解剖鏡下剪去角膜及晶體,oct包埋并迅速置于-80℃冰箱冷凍。大約10min后,取出oct包埋的眼球,置于冰凍切片機-25℃平衡約30min后即可切片。切片厚度為12μm。切片完成后,選取質(zhì)量較高的片子于37℃烘箱放置30min,然后免疫組化筆在有視網(wǎng)膜組織的地方畫圈,pbs洗三遍以去除oct。上海實驗動物模型橄欖油聯(lián)合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型。
動物的選擇目前常用的模式生物有果蠅、酵母、小鼠、斑馬魚等。目前主要是小鼠黑色素瘤模型。造模方法黑色素瘤小鼠模型可分為誘發(fā)性模型、移植性模型、轉(zhuǎn)基因模型。一、誘導(dǎo)性模型應(yīng)用:誘導(dǎo)的小鼠模型模擬人類受外界因素影響獲得的黑色素瘤,常用于研究預(yù)防黑色素瘤形成。1紫外線誘導(dǎo)的小鼠模型通過紫外線照射獲得的黑色素瘤模型被認(rèn)為是臨床上可靠的模型。方法:有研究者將HGF/SFcDNA表達(dá)的小鼠置于日光燈下用不同劑量(kJ/m2UVB、kJ/m2UVA、)進行紫外誘導(dǎo)15min。模型驗證:誘導(dǎo)后的小鼠出現(xiàn)皮膚發(fā)紅,偶有淺表皮脫屑,在組織病理學(xué)中觀察到小鼠產(chǎn)生的大多數(shù)皮膚黑色素瘤中具有真皮成分,病變顯示具有垂直生長期或浸潤性惡性黑色素瘤以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,這些病變與人類患者黑色素瘤頁面狀擴散的表皮內(nèi)病變特征相似。缺點:但野生型或正常型小鼠一般不易發(fā)生UV誘導(dǎo)的黑色素瘤,因此UV誘導(dǎo)的黑色素瘤小鼠模型往往需要聯(lián)合免疫缺陷小鼠,其操作技術(shù)較難、成本較高。2化學(xué)誘導(dǎo)化學(xué)致物誘導(dǎo)黑色素瘤小鼠模型大多采用DMBA和TBA誘導(dǎo)。DMBA是一種免疫抑制多環(huán)芳烴,其致機理是其活性代謝物被CYP450代謝成致物1,2-環(huán)氧化物-3,4-二醇DMBA,進而損傷DNA。TPA是通過蛋白激酶C充當(dāng)啟動子。
靜置25分鐘后把酒精倒干,用吸水紙吸出多余的酒精,然后配壓縮膠,同樣的操作,關(guān)鍵是梳子要插得快,要小心梳子下產(chǎn)生氣泡,然后靜置30分鐘。如果是當(dāng)天跑膠,我會等上層膠凝2個小時再用,但要注意防干燥縮水,可以在一個小時的時候沿著梳子上緣加點電泳液。所以我一般提前一晚制膠,泡于純水或者電泳液里置于4度冰箱暫存。三、蛋白電泳1、上樣前準(zhǔn)備把膠組裝到電泳芯上,注意密閉性(否則漏液),如果內(nèi)槽漏液就不是勻強電場了,條帶可能就不是一條直線。然后內(nèi)槽倒?jié)M電泳液,拔梳子,這一步要小心,梳子要兩邊一起緩緩?fù)习纬?,然后觀察泳道內(nèi)有無脫落的膠?;蛘吣z絲,有的話用1毫升注射器吸出。然后從冰箱取出蛋白樣品,解凍。準(zhǔn)備振蕩器。2、上樣和電泳注意,上樣后蛋白會開始慢慢在膠中彌散,所以上樣越快越好。我習(xí)慣先上蛋白Marker,再上蛋白樣品,蛋白上樣前確保樣品完全解凍和充分振蕩(推薦使用振蕩器振蕩),吸的時候沒有拉絲即可,建議上樣分鐘把樣品從冰上取出來,不然樣品中SDS可能會結(jié)晶析出,從而影響電泳效果。上層膠80V25分鐘,下層膠120V65分鐘。四、轉(zhuǎn)膜1、轉(zhuǎn)膜前準(zhǔn)備我會在電泳結(jié)束0分鐘準(zhǔn)備,把轉(zhuǎn)膜液配好置于4度冰箱預(yù)冷,然后裁膜,準(zhǔn)備轉(zhuǎn)膜裝置。它主要影響身體內(nèi)的大中動脈,如冠狀動脈、頸動脈、腦動脈和腎動脈等,其發(fā)病機制的主要過程。
伴vonFreyhairs檢測)熱板法大/小鼠甩尾法大/小鼠熱輻射致痛法大/小鼠壓痛法大/小鼠VonFreyhairs法大/小鼠醋酸扭體法小鼠福爾馬林致痛法大/小鼠佐劑CFA引起的疼痛大/小鼠角叉菜膠致痛模型大/小鼠LPS誘導(dǎo)痛模型大/小鼠脊神經(jīng)選擇性結(jié)扎(L5/L6)大/小鼠坐骨神經(jīng)分枝選擇性損傷模型(SNI)大/小鼠糖尿病疼痛、切口疼痛,性疼痛模型大/小鼠抗癡呆小鼠獲得性記憶障礙模型(6道小鼠跳臺視屏分析系統(tǒng))小鼠小鼠記憶鞏固不良模型(6道小鼠跳臺視屏分析系統(tǒng))小鼠小鼠記憶再現(xiàn)障礙模型(6道小鼠避暗視屏分析系統(tǒng))小鼠小鼠明暗箱法(4道小鼠明暗箱視屏分析系統(tǒng))小鼠大鼠獲得性記憶障礙模型(Morris水迷宮視屏分析系統(tǒng))大鼠小鼠腦內(nèi)乙酰膽堿酯酶活力測定小鼠D-半乳糖致小鼠癡呆模型小鼠新物體識別實驗大鼠APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠模型(Morriswatermaze,CognitionWall)轉(zhuǎn)基因小鼠體外實驗細(xì)胞水平。小鼠CLP盲腸穿孔致膿毒血癥模型。上海基因敲除動物模型建模
臨床上平時不易見到的疾病可用動物隨時復(fù)制出來。上海C57動物模型服務(wù)
通過無極調(diào)控微負(fù)壓裝置來調(diào)節(jié)飼養(yǎng)倉2內(nèi)的壓力,通過高原低氧環(huán)境模擬裝置來調(diào)整飼養(yǎng)倉2內(nèi)氧含量,當(dāng)需要燈光時,通過高原光照環(huán)境模擬裝置15開啟紫外燈以及照明燈,通過高原溫度環(huán)境模擬裝置16來進行調(diào)溫,通過高原濕度環(huán)境模擬裝置17調(diào)節(jié)飼養(yǎng)倉2內(nèi)濕度,通過動物行為學(xué)遠(yuǎn)程觀察單元18可以監(jiān)控動物的行為,飼養(yǎng)倉2內(nèi)若干代謝籠3配備投料斗8、飲水瓶9可以進行攝食量、飲水量測定,聚糞斗10、尿液排出口11、糞便排出口12便于模型動物的尿液和糞便常規(guī)檢測,并且本系統(tǒng)設(shè)置的多個代謝籠3可以同時培養(yǎng)多種動物,造模動物多。實施例2在實施例1的基礎(chǔ)上提供的一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng),所述無極調(diào)控微負(fù)壓裝置包括進風(fēng)系統(tǒng)13、排風(fēng)系統(tǒng)14和霍尼威爾或西門子調(diào)控模塊,所述進風(fēng)系統(tǒng)13設(shè)置在功能設(shè)備集成底座1內(nèi),所述排風(fēng)系統(tǒng)14設(shè)置在飼養(yǎng)倉2頂部。本實施例的工作原理:本系統(tǒng)進風(fēng)系統(tǒng)13內(nèi)集成有進風(fēng)風(fēng)機單元、排風(fēng)系統(tǒng)14集內(nèi)成有排風(fēng)風(fēng)機單元。由于飼養(yǎng)倉2能夠密封,通過改變風(fēng)機風(fēng)量的方式來調(diào)節(jié)壓差,進風(fēng)風(fēng)機單元和排風(fēng)風(fēng)機單元均與飼養(yǎng)倉2連通,通過調(diào)節(jié)進、排風(fēng)的壓力差值,系統(tǒng)內(nèi)環(huán)境能夠形成(~)微負(fù)壓,系統(tǒng)配置霍尼威爾或西門子調(diào)控模塊。上海C57動物模型服務(wù)