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e：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應視網(wǎng)膜電圖b波統(tǒng)計；scotopicamplitude：暗光測定峰值；flashintensity：閃光強度；a-wave：a波；b-wave：b波。圖6：光適應視網(wǎng)膜電圖(erg)檢測結(jié)果；圖中：a-b：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網(wǎng)膜電圖軌跡圖；c：20cd·s/m2光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應閃爍(flicker)視網(wǎng)膜電圖軌跡圖；d：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網(wǎng)膜電圖a波統(tǒng)計；e：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網(wǎng)膜電圖b波統(tǒng)計；f：20cd·s/m2光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應閃爍(flicker)視網(wǎng)膜電圖統(tǒng)計。sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠；ctr是指野生型；het是指雜合子。圖7：視網(wǎng)膜前體細胞特異敲除gm20541基因小鼠視網(wǎng)膜切片免疫組化染色結(jié)果；小鼠年齡：4個月；os：outer-segment(外節(jié))；is：inner-segment(內(nèi)節(jié))；onl：outernuclearlayer(外核層)；inl：innernuclearlayer(內(nèi)核層)；圖中：a：視網(wǎng)膜前體細胞特異敲除gm20541基因小鼠視網(wǎng)膜石蠟切片的h&e染色結(jié)果，外核層及內(nèi)核層均變??；b：對不同部位的gm20541敲除鼠視網(wǎng)膜外核層厚度統(tǒng)計。圖8：視網(wǎng)膜前體細胞特異敲除gm20541基因小鼠ihc染色結(jié)果。博萊霉素是具有多種抗腫瘤作用的多組分，其毒副作用之一是引起肺纖維化。上海實驗動物模型服務

brain：腦組織；liver：肝臟；retina：視網(wǎng)膜，intestine：腸；muscle：肌肉；heart：心臟；kidney：腎臟；spleen：脾；b：圖1中a的統(tǒng)計結(jié)果；c:westernblot檢測gm20541蛋白在不同組織的表達；d:圖1中c的統(tǒng)計結(jié)果。圖2：gm20541基因敲除小鼠的構(gòu)建路線；圖中sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠；ctr是指野生型；het是指雜合子。圖3：中長距離pcr鑒定子一代鼠的結(jié)果；圖中：a：擴增5’端長臂使用引物對gm5’lrf和sa3’r,擴增產(chǎn)物為；其中a2,3,6,9,10,b1為陽性；b：擴增3’端長臂使用引物對neof和gm3’lrr，擴增產(chǎn)物為。其中：a2,3,6,9,10,b6,9,es1g,es2g為陽性雜合子，+/+為野生型對照。圖4：gm20541基因敲除小鼠的鑒定；a：gm20541基因敲除小鼠的基因型鑒定結(jié)果；b：實時定量pcr實驗分析gm20541敲除小鼠視網(wǎng)膜中基因敲除效率，證明gm20541在敲除小鼠視網(wǎng)膜中不再表達；sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠；ctr是指野生型；het是指雜合子。圖5：暗適應視網(wǎng)膜電圖(electroretinogram,erg)檢測結(jié)果；圖中：a-c：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應視網(wǎng)膜電圖軌跡圖；d：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應視網(wǎng)膜電圖a波統(tǒng)計。上海模式動物模型構(gòu)建IgA腎病小鼠模型IgA 腎病是常見的原發(fā)性腎小球疾病,約占原發(fā)性腎小球疾病的 1/3。

動物疾病模型在人類重大疾病研究和新藥創(chuàng)制等方面具有不可替代的重要作用和價值。與自發(fā)性疾病動物模型和環(huán)境誘導、物理因素、藥物誘導的疾病動物模型相比，手術模型操作復雜、技術門檻高，因此也存在相應的一些問題，如缺乏標準化流程、穩(wěn)定性差、實驗室之間數(shù)據(jù)可比性較差。即便是同一個實驗室，重復性也是一個很大的挑戰(zhàn)。所以實現(xiàn)手術疾病模型的標準化、規(guī)范化和重復性仍然是該領域長期的目標。針對這一現(xiàn)狀，賽業(yè)生物利用多年積累的的堅實經(jīng)驗、高效的團隊組建及管理經(jīng)驗，歷經(jīng)兩年籌備，打造了一支技術過硬的小鼠手術模型服務團隊，熟練掌握多種模型的制備，具備建立復雜及復合手術疾病模型的能力。我們以項目“可重復”作為金標準，對于客戶復雜的項目需求或文獻未見、少見的疾病模型，我們會與客戶緊密協(xié)作，認真理解和把握需求，制定科學合理的手術模型造模方案。希望我們提供的專業(yè)且穩(wěn)定的手術模型服務可以節(jié)省您的時間和精力，讓您可以聚焦到科學創(chuàng)新性的工作上來。服務優(yōu)勢1.以實驗“可重復”作為服務標準我們以實驗“可重復”作為金標準，對技術團隊進行大量的手術模型操作訓練，確保疾病模型多個批次之間數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性。2.一站式服務。

把膜先用TBST泡洗兩遍再用5%脫脂奶粉或者BSA室溫封閉1-2小時。注意一定要讓蛋白面充分接觸封閉液。2、孵一抗脫脂奶粉封閉的話，要用TBST泡洗三遍再轉(zhuǎn)移至一抗溶液中，BSA封閉的可以直接轉(zhuǎn)移至一抗中。如果膜的寬(膜是一個長方形，這里的寬與長相對應)不大于8毫米，我習慣置于15毫升離心管中孵育，兩條膜"背對背"式放置于一個管子里(3毫升液體即可)。如果大于8毫米，就用普通的5格的一抗孵育盒(4毫升即可)。4度過夜，一般是12-18個小時，注意放置水平，用搖床。內(nèi)參等蛋白豐度很高的如果孵久了可能出現(xiàn)條帶連在一起的情況，這時可以縮短孵育時間或者降低一抗的濃度。六、孵二抗顯影1、孵二抗室溫一個小時足矣。這步要注意的是建議用5%BSA或者脫脂奶粉稀釋二抗，這樣背景會干凈許多。也要注意膜的蛋白面要充分接觸二抗溶液，我們一般一條膜一個槽地孵。2、顯影這一步有個細節(jié)可能有些同學沒注意到，就是ECL發(fā)光液要與HRP反應一分鐘后顯影效果才會更好，還有要注意的是顯影液要均勻覆蓋，一般第二次顯影(加新的顯影液)比一次好看。小鼠腎纖維化（UUO）模型建立。

省心省時一些基因編輯鼠模型表型不易發(fā)現(xiàn)，需要結(jié)合外科手術造模、物理刺激或藥物誘導才能發(fā)現(xiàn)表型。專業(yè)的手術模型團隊結(jié)合成熟穩(wěn)定的基因修飾鼠平臺和飼養(yǎng)繁育平臺，賽業(yè)生物可為您提供一站式“基因編輯鼠模型制備——種群擴繁——手術造模——表型驗證”服務，讓您省心省時。3.專業(yè)的技術支持賽業(yè)生物專業(yè)的小動物外科手術團隊熟練掌握多種模型的制備，具備建立復雜及復合手術疾病模型的能力，可能夠根據(jù)您的需求，制定合理的實驗計劃，同時提供及時的項目匯報與售后服務，讓您省事省心。，確保動物福利與質(zhì)量標準與國際接軌賽業(yè)模式動物中心通過ISO9001:2015和AAALAC雙認證，ISO9001:2015認證確保向廣大學者提供的所有產(chǎn)品和技術服務符合國際標準，AAALAC認證表明了賽業(yè)生物尊重動物福利和倫理，重視生物**的負責態(tài)度。適用動物品種：大鼠、小鼠。手術疾病模型團隊首席科學家簡介張榮利博士張榮利博士有二十多年小鼠手術疾病模型制備經(jīng)驗，畢業(yè)后先后在中國中醫(yī)科學院、清華大學、北京大學及國際學術機構(gòu)任職，2011年起在美國CaseWesternReserveUniversity工作，任ResearchScientist并擔任心血管生理學實驗室主任，負責基因工程動物的疾病表型發(fā)現(xiàn)與新藥臨床前研究。膽管結(jié)扎誘導炎癥性肝損傷和肝纖維化小鼠模型。上海裸鼠動物模型實驗

控制原發(fā)病，遏制其誘導的全身失控性炎癥反應，是預防和ALI/ARDS的必要措施。上海實驗動物模型服務

根據(jù)gm20541的cdna序列設計引物：gm20541-cdna-f：5’-tcggtctcatcttcattccc-3；gm20541-cdna-r：5’-ggaaggctctgttccggtat-3；(g)以提取的cdna為模板，進行rt-pcr。擴增后進行電泳。結(jié)果見圖4中b，可以看出，通過rt-pcr方法檢測gm20541在gm20541基因敲除純合子小鼠的視網(wǎng)膜中表達量降低。圖4的b中ctrl是指野生型對照，sixko是指gm20541基因敲除純合子小鼠；gm20541rnalevel是指rna表達水平相對變化，以野生型表達水平為1。實施例3對4月齡的gm20541基因敲除純合子小鼠進行erg視力檢測：1暗適應動物應整夜暗適應，環(huán)境應做到?jīng)]有光線；2次日麻醉：稱重，腹腔內(nèi)注射；宜深度麻醉；3動物固定及散瞳：麻醉完成后，在暗紅光照明下將小鼠用膠帶固定在動物試驗平臺的前方：需保證小鼠正"趴"，即相對于閃光刺激器的刺激口，雙眼高度一致，充分暴露，滴加散瞳劑。4電極安裝：將視網(wǎng)膜電圖儀(espionvisualelectrophysiologysystem,diagnosysllc,littleton,ma,usa)預熱后，在耳夾電極涂上導電膏，夾尾巴，插入放大器“地”接口；雙頭的針電極插入后頸皮(大約在兩耳中間)，同時接兩個通道的“負”接口；金環(huán)電極夾在動物實驗平臺的電極支架上，仔細調(diào)整其角度。上海實驗動物模型服務